无论是在同一实验室进行多次相同实验,还是不同实验室间开展对比研究,使用相同规格的
制备色谱柱空柱管都能得到相近的色谱分析结果。这一特性减少了实验误差,提高了数据的可信度和可比性,为科学研究和质量控制工作提供了有力支持。制造工艺优化了空柱管的内部结构,有效降低了样品扩散和涡流扩散等不良影响,从而实现了高柱效。同时,其材质优良、结构稳定,能够承受长时间、高强度的使用,即使在频繁的进样和复杂的样品基质冲击下,依然保持良好的性能状态,大大降低了使用成本和维护频率。
制备色谱柱空柱管的使用注意事项:
1.活化与老化处理
-新柱使用前:需要进行活化(老化)处理。一般来说,新反相制备柱要用纯甲醇冲洗约30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗约30个柱体积,用流动相稳定系统至基线平衡。这有助于去除生产过程中残留的杂质,使柱子达到最佳的工作状态。
2.控制柱温
-温度限制:严格遵守柱子的最高使用温度规定,避免超过此温度范围。过高的温度可能会导致固定相流失、柱床结构改变等问题,从而影响柱效和分离效果。
3.样品预处理
-过滤除杂:样品应经过适当的预处理,如过滤去除颗粒物,以防止堵塞或污染色谱柱。大颗粒的物质可能会损坏柱内的填料结构,而杂质则可能吸附在填料表面,降低柱效。
4.流动相管理
-脱气操作:流动相需脱气,防止气泡进入影响柱效。气泡会在柱内形成气穴,干扰样品的传质过程,导致峰形展宽、分离度下降等问题。
-pH控制:严格控制流动相pH在色谱柱耐受范围内。不同基质的填料具有不同的pH适用范围,超出范围可能会引起键合相水解、硅胶溶解等不可逆反应,特别是在温度较高时,会使柱效迅速降低而报废。
-纯度要求:确保流动相含有微量不溶性杂质颗粒,否则很容易在柱头部位被截留,久而久之造成色谱柱机械性堵塞,引起柱压升高而无法正常使用。
5.压力稳定性
-避免波动:在使用过程中要避免剧烈的压力波动,防止柱床塌陷。突然的压力变化可能会破坏柱内填料的均匀性和紧密性,影响分离效果。
6.保存与维护
-冲洗与封存:使用后用合适溶剂冲洗,不用时封住两端以防污染和氧化。这样可以延长柱子的使用寿命,保持其性能稳定。
-定期清洗:根据使用情况定期对色谱柱进行清洗,以去除积累的杂质和污染物。但要注意选择合适的清洗方法和溶剂,避免对柱子造成损害。
7.防止死体积产生
-正确填充:在填充固定相时,要保证装填紧密均匀,避免产生死体积。死体积会导致样品扩散加剧,降低分离效率。同时,柱两端要用玻璃棉或石英棉塞紧,位置恰当,防止固定相漏出且不产生额外的死体积。