在复杂的样品分析中,样品中的杂质可能会逐渐沉积在分析柱的填料上,导致柱效下降、压力升高甚至柱堵塞。
保护柱柱芯能够提前拦截这些杂质,使分析柱免受污染。例如,在环境水样分析中,水中的悬浮颗粒、腐殖质等杂质如果没有被保护柱去除,会不断积累在分析柱前端,影响分析柱的分离性能。而保护柱可以有效阻止这些杂质进入分析柱,大大延长分析柱的使用时间。
可以对这些具有潜在化学破坏性的物质进行预处理。比如,在一些有机溶剂含量较高的样品分析中,可能会存在一些酸性或碱性较强的杂质,这些杂质可能会腐蚀分析柱的硅胶基质填料。保护柱能够先与这些物质作用,保护分析柱的化学稳定性,从而延长分析柱的使用寿命。
由于该保护柱柱芯的存在,分析柱始终处于相对清洁和稳定的工作环境中。这使得分析柱的柱效、保留时间等性能参数能够保持相对稳定。在多次进样分析过程中,不会因为分析柱性能的逐渐变化而导致分析结果出现较大偏差。例如,在药物质量控制的长期分析中,使用保护柱可以使分析柱的性能在整个分析周期内保持良好,确保不同批次样品分析结果的准确性和重复性。
能够去除样品中的干扰物质,避免这些物质在分析柱中产生额外的峰或干扰目标峰的分离。例如,在食品添加剂分析中,样品中的一些色素、油脂等杂质如果没有被有效去除,可能会与目标添加剂成分的峰重叠,影响定量分析的准确性。保护柱可以将这些干扰物质去除,提高分析结果的准确性。
保护柱柱芯的测定步骤:
1.清洗保护柱芯:将保护柱芯放入容器中,用适当的溶剂(如甲醇或乙腈)清洗,以去除可能存在的污染物。
2.加入填料:将合适的填料(如C18或C8)加入保护柱芯中。通常,填料的量应该是保护柱芯体积的2/3到3/4。
3.匀浆填料:使用移液器将溶剂加入保护柱芯中,然后用手指轻轻敲打容器,使填料均匀地分布在保护柱芯中。
4.抽真空:将保护柱芯放入真空干燥器中,抽真空至少15分钟,以去除填料中的气泡。
5.安装保护柱芯:将装填好的保护柱芯安装在液相色谱柱的前端,确保连接紧密。
6.平衡色谱柱:将液相色谱柱与输液系统连接,用适当的流动相平衡色谱柱,确保基线稳定。